Ruiz-de-la-Herrán, J., Tomé-Amat, J., Lázaro-Gorines, R., Gavilanes, J.G., Lacadena, J.

Inclusion of a Furin Cleavage Site Enhances Antitumor Efficacy against Colorectal Cancer Cells of Ribotoxin α-Sarcin- or RNase T1-Based Immunotoxins

Toxins (Basel). 2019 Oct 12;11(10). pii: E593

DOI: 10.3390/toxins11100593

RESUMEN

Las inmunotoxinas son moléculas quiméricas que combinan la especificidad de un anticuerpo para reconocer y unir antígenos tumorales con la potencia de la actividad enzimática de una toxina, promoviendo así la muerte de las células diana. Entre ellos, las inmunotoxinas basadas en ribonucleasas resultan ser agentes terapéuticos antitumorales prometedores. En este trabajo se describe la producción y purificación de dos nuevos inmunoconjugados, basados en la RNasa T1 y la ribotoxina fúngica α-sarcina, con propiedades optimizadas para el tratamiento tumoral debido a la inclusión de un sitio de rotura para la proteasa furina. Estas nuevas moléculas quiméricas se han caracterizado in vitro, tanto estructural como funcionalmente, utilizando espectroscopia de dicroísmo circular, estudios de actividad ribonucleolítica, citometría de flujo, microscopía de fluorescencia y ensayos de viabilidad celular. Los resultados confirman la mayor eficacia antitumoral demostrada por estas variantes de furina-inmunotoxina como resultado de una mejor liberación de su dominio tóxico al citosol, favoreciendo la accesibilidad de ambas ribonucleasas a sus sustratos. En general, estos resultados representan un importante paso adelante en el diseño de inmunotoxinas con mejores propiedades para su posible aplicación terapéutica in vivo.